В 1930-х — 1950-х работал художником в Тбилисском театре оперы и балета. Писал портреты и картины на темы старой Грузии, сочетая в своем творчестве черты средневекового грузинского искусства и западноевропейских течений 1920-х.

В период Великой Отечественной войны в 1942–1943 создал цикл антифашистских рисунков тушью. Работал как книжный график, выполнил иллюстрации к «Мудрости вымысла» С. С. Орбелиани (1939 и 1960, два варианта) и «Грузинским народным песням» Г. Чхиквадзе (1946).

В 1946 заново расписал храм Кашвети в Тбилиси, за что был исключен из ВКП(б) и уволен из Тбилисской Академии художеств.

В 1957 был удостоен звания народного художника Грузинской ССР, в 1972 — народного художника СССР, в 1976 — Героя Социалистического Труда.

Ладо Гудиашвили — один из ведущих грузинских художников ХХ столетия. Ранние картины мастера с их романтикой национального быта сочетают драматический гротеск с обаянием поэтической тайны. Близость к традициям старокавказского и персидского искусства усиливается с его возвращением на родину в 1925. Художник охотно прибегал в своем искусстве к мифологическим аллегориям и фольклорным мотивам. Характерной особенностью творческой манеры Гудиашвили является декоративность и повышенная экспрессивность.

Произведения Гудиашвили находятся во многих музейных и частных собраниях, в том числе в Государственной Третьяковской галерее, Государственном центральном театральном музее им. А. А. Бахрушина, Государственном музее народов Востока, Московском музее современного искусства, Государственном музее искусств Грузии в Тбилиси.